2×PCR Master Mix (fără colorant)
PCR Master Mix este un fel de soluție convențională PCR premixată, care este gata de utilizare, inclusiv Taq DNA Polymerase, dNTP mix MgCl2 și tampon optimizat.În timpul reacției, numai primerul și șablonul pot fi adăugate pentru amplificare, ceea ce simplifică foarte mult etapele de operare ale experimentului.Acest produs conține stabilizatori excelenți și poate fi păstrat timp de 3 luni la 4℃.Produsul PCR are o proeminență 3′-dA și poate fi donat cu ușurință în vectorul T.
Conditii de depozitare
Produsul trebuie păstrat la -25℃ ~ -15℃ timp de doi ani.
Specificații
Fidelitate (vs.Taq) | 1× |
Hot Start | No |
surplontă | 3′-A |
Polimeraza | Taq ADN polimeraza |
Format de reacție | SuperMix sau Master Mix |
Viteza de reactie | Standard |
Tip produs | PCR Master Mix (2×) |
Instrucțiuni
1.Sistem de reacție
Componente | Dimensiune (μL) |
ADN șablon | Potrivit |
Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | Până la 50 |
2.Protocol de amplificare
Ciclul etapelor | Temperatura (°C) | Timp | Cicluri |
Pre-denaturare | 94 ℃ | 5 minute | 1 |
Denaturarea | 94 ℃ | 30 sec | 35 |
Recoacerea | 50-60 ℃ | 30 sec | |
Extensie | 72 ℃ | 30-60sec/kb | |
Prelungire finală | 72 ℃ | 10 minute | 1 |
Note:
1) Utilizare șablon: 50-200 ng ADN genomic;0,1-10 ng ADN plasmid.
2) Mg2+concentrație: Acest produs conține 3 mM de MgCl2 potrivit pentru majoritatea reacțiilor PCR.
3) Temperatura de recoacere: Vă rugăm să consultați valoarea teoretică a Tm a Primerilor.Temperatura de recoacere poate fi setată la 2-5 ℃ mai mică decât valoarea teoretică a grundului.
4) Timp de prelungire: Pentru identificarea moleculară, se recomandă 30 sec/kb.Pentru clonarea genelor, 60sec/kb este recomandat.
Note
1.Pentru siguranța și sănătatea dumneavoastră, vă rugăm să purtați halate de laborator și mănuși de unică folosință pentru operare.
2.Numai pentru cercetare!