One Step Fast RT-qPCR Probe Premix-UNG
Cat No: HCR5143A
Kitul de sondă RT-qPCR One Step (FOR FAST) este un kit de detecție rapidă RT-qPCR bazat pe sondă, potrivit pentru PCR cantitativă single-plex sau multiplex folosind ARN ca șablon (cum ar fi virusul ARN).Acest produs folosește o nouă generație de ADN polimerază Taq modificată cu anticorpi și transcriptază inversă dedicată într-un singur pas, cu un tampon optimizat pentru amplificare rapidă, care are o viteză de amplificare mai rapidă, o eficiență și specificitate mai ridicate de amplificare.Acceptă amplificarea echilibrată atât în single-plex, cât și în multiplex, a probelor de concentrație scăzută și mare într-un timp scurt.
Componente
1. 5×RT-qPCR tampon (U+)
2. Amestecul de enzime (U+)
Note:
A.Tamponul 5×RT-qPCR (U+) include dNTP și Mg2+;
b.Amestecul de enzime (U+) include transcriptază inversă, ADN polimeraza Hot Start Taq, inhibitor de RNază și UDG;
c.Utilizați vârfuri fără RNază, tuburi EP etc.
Înainte de utilizare, amestecați bine tamponul 5×RT-qPCR (U+).Dacă există precipitații după decongelare, așteptați ca tamponul să revină la temperatura camerei, amestecați și dizolvați, apoi utilizați-le în mod normal.
Conditii de depozitare
Produsul este livrat cu gheață carbonică și poate fi păstrat la -25~-15℃ timp de 1 an.
Instrucțiuni
1. Reacție Sistem
| Componente | Volumul (20 μL reacţie) |
| 2 × RT-qPCR tampon | 4μL |
| Amestec de enzime (U+) | 0,8μL |
| Primer înainte | 0,1 ~ 1,0μM |
| Grund invers | 0,1 ~ 1,0μM |
| Sonda TaqMan | 0,05~0,25μM |
| Șablon | X μL |
| Apă fără RNază | până la 25μL |
Note: Volumul de reacție este de 10-50μL.
2. Protocolul de ciclism (Sstandard)
| Ciclu Etapa | Temp. | Timp | Cicluri |
| Transcriere inversă | 55 ℃ | 10 minute | 1 |
| Denaturarea inițială | 95 ℃ | 30 sec | 1 |
| Denaturarea | 95 ℃ | 10 sec | 45 |
| Recoacere/Extindere | 60 ℃ | 30 sec |
| Protocol de ciclism (Rapid) Ciclu Etapa |
Temp. |
Timp |
Cicluri |
| Transcriere inversă | 55 ℃ | 5 minute | 1 |
| Denaturarea inițială | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| Denaturarea | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| Recoacere/Extindere | 60 ℃ | 10 s |
Note:
A.Temperatura de transcripție inversă este între 50℃ și 60℃, creșterea temperaturii ajută la amplificarea structurilor complexe și a șabloanelor cu conținut ridicat de CG;
b.Temperatura optimă de recoacere trebuie ajustată pe baza valorii Tm a primerului și selectați cel mai scurt timp pentru colectarea semnalului de fluorescență pe baza instrumentului de PCR în timp real.
Note
Vă rugăm să purtați EIP necesar, cum ar fi halatul de laborator și mănuși, pentru a vă asigura sănătatea și siguranța!
