Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Descriere
Cat No: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix este un kit PCR cantitativ multiplex bazat pe ARN ca matriță.În experiment, transcrierea inversă și PCR cantitativă sunt efectuate în același tub de reacție, simplificând operațiunea experimentală și reducând riscul de contaminare.Designul unic al amestecului de tampon și enzime poate fi utilizat într-un sistem liofilizat într-o singură etapă.Trusa utilizează Reverse Transcriptaza rezistentă la căldură pentru sinteza eficientă a ADNc-ului primei catene folosind ADN polimeraza Taq cu start la cald pentru amplificarea cantitativă.Conține tampon de reacție optimizat, amestec de enzime etc., și au fost adăugați factori care inhibă eficient amplificarea nespecifică PCR și sporesc eficiența de amplificare a mai multor reacții qPCR, permițând amplificarea cantitativă cu fluorescență multiplă, asigurând în același timp eficiența de amplificare a primerilor.
Componente
| Nume |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Mix de lyo-enzime |
| 3. Lyoprotector |
Conditii de transportion
A: Lyo-tampon și protector: -25~-15℃, termenul de valabilitate este de 1 an.
B: amestec de lio-enzime, 2-8 ℃, termenul de valabilitate este de 6 luni.
Instrucțiuni de funcționare
1. Sistem de reacție (Luați 25μL ca exemplu)
| Componente | Volumul (μL) | Concentrarea finală |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Amestec de lyo-enzime | 1 | - |
| Lyo-protector | 8 | - |
| Amestecul de amorsare (10μM) | 1 | 0,1-1 uM |
| Amestec de sondă (10μM) | 0,5 | 0,05-0,5uM |
| Șablon ARN | 5 | - |
| DEPC H2O | Până la 25 | - |
2. Protocol optimizat de ciclism
1) Protocol standard de ciclism
| Etapa de reacție | Temperatura | Timp | Ciclu | |
| 1 | Transcriere inversă | 50°Ca | 10 minute | 1 |
| 2 | Denaturarea inițială | 95°C | 5 minute | 1 |
| 3 | Reacția de amplificare | 95°C | 15 sec | 45 de cicluri |
| 60°Cb | 30 secc |
2) Protocolul de ciclism rapid
|
| Etapa de reacție | Temperatura | Timp | Ciclu |
| 1 | Transcriere inversă | 50°Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Denaturarea inițială | 95°C | 2 sec | 1 |
| 3 | Reacția de amplificare | 95°C | 1 sec |
45 de cicluri |
| 60°Cb | 13 secc |
Notă:
a) Verso transcriere: Temperatura poate selecta 42°C sau 50°C pentru 10-15 minute.
b) Reacția de amplificare: Temperatura este ajustată în funcție de valoarea Tm a grundurilor proiectate.
c)Fluorescenţă semnal achiziţie: Vă rugăm să setați procedura experimentală în conformitate cu cerințelemanualul instrumentului.
Informații tehnice/Specificații
| Hot Start | Pornire la cald încorporată |
| Metoda de detectare | Detectare amorsare-sondă |
| Metoda PCR | RT-qPCR într-un pas |
| Tipul eșantionului | ARN |
Note
1. Acest produs este destinat exclusiv cercetării.
2. Vă rugăm să purtați EIP-ul necesar, cum ar fi halat de laborator și mănuși, pentru a vă asigura sănătatea și siguranța!
