Peroxidază (sursă de hrean) Sinonim: Peroxid de hidrogen oxidoreductază;HRP

Peroxidaza de hrean (HRP) este izolată din rădăcinile de hrean (Amoracia rusticana) și aparține grupului de peroxidaze feroprotoporfirine.HRP se combină ușor cu peroxidul de hidrogen (H2O2).Complexul [HRP-H2O2] rezultat poate oxida o mare varietate de donatori de hidrogen:
Donator + H2O2 → Donor oxidat + 2 H2O
HRP va oxida diferite substraturi (vezi Tabelul 1):
• Cromogenic
• Chemiluminiscent (cum ar fi luminol sau izoluminol)
• Fluorogen (cum ar fi tiramina, acidul homovanilic sau acidul 4-hidroxifenil acetic)
HRP este o polipeptidă cu un singur lanț care conține patru punți disulfurice.HRP este o glicoproteină care conține 18% carbohidrați.Compoziția de carbohidrați constă din galactoză, arabinoză, xiloză, fucoză, manoză, manozamină și galactozamină, în funcție de izoenzima specifică.

HRP este o etichetă utilizată pe scară largă pentru imunoglobuline în multe aplicații diferite de imunochimie, inclusiv imunoblotting, imunohistochimie și ELISA.HRP poate fi conjugat la anticorpi prin mai multe metode diferite, incluzând glutaraldehida, oxidarea periodatului, prin legături disulfurice și, de asemenea, prin reticulanți direcționați amino și tiol.HRP este cea mai dorită etichetă pentru anticorpi, deoarece este cea mai mică și mai stabilă dintre cele trei cele mai populare etichete enzimatice (peroxidază, β-galactozidază, fosfatază alcalină) și glicozilarea sa duce la o legare nespecifică mai scăzută.A fost publicată o revizuire a metodelor de conjugare cu glutaraldehidă și periodat.

Peroxidaza este, de asemenea, utilizată pentru determinarea glucozei4 și a peroxizilor în soluție.Mai multe publicații, 6-24 teze, 25-29 și disertațiile 30-46 au citat utilizarea lui P8375 în protocoalele lor de cercetare.