Fosfataza alcalina (ALP)
Descriere
Fosfataza alcalină este derivată dintr-o tulpină recombinată de E. coli care poartă gena TAB5.Enzima catalizează defosforilarea capetelor 5’ și 3’ ale fosfomonoesterilor ADN și ARN.De asemenea, hidrolizează riboza, precum și trifosfații dezoxiribonucleozidici (NTP și dNTP).Fosfataza alcalină TAB5 acționează asupra capetelor proeminente de 5′, încastrate și contondente.Fosfataza poate fi utilizată în multe aplicații de biologie moleculară, cum ar fi clonarea sau marcarea capătului sondei pentru a îndepărta capetele fosforilate ale ADN-ului sau ARN-ului.În experimentele de clonare, defosforilarea previne autoligarea ADN-ului plasmid linearizat.De asemenea, poate degrada dNTP-urile neîncorporate în reacțiile PCR pentru a pregăti un șablon pentru secvențierea ADN-ului.Enzima este inactivată complet și ireversibil prin încălzire la 70°C timp de 5 minute, făcând astfel inutilă îndepărtarea fosfatazei înainte de ligatură sau etichetare finală.
Utilizare
1. Fosfataza alcalină cuplată la proteine (anticorpi, streptavidină etc.) poate identifica în mod specific moleculele țintă și poate fi utilizată în ELISA, WB și detecția histochimică;
2. Fosfataza alcalină poate fi utilizată pentru a defosforiza terminalul 5' al ADN-ului sau ARN-ului pentru a preveni auto-legarea;
3. ADN-ul sau ARN-ul defosforilat de mai sus poate fi marcat cu fosfați marcați radio (prin intermediul polinucleotid kinazei T4)
Structura chimică
Specificație
| Elemente de testare | Specificații |
| Activitatea Enzimatică | 5U/μL |
| Activitatea endonucleazei | Nu a fost detectat |
| Activitate exonuclează | Nu a fost detectat |
| Activitate de Nicking | Nu a fost detectat |
| Activitatea RNazelor | Nu a fost detectat |
| ADN-ul E.coli | ≤1copie/5U |
| Endotoxina | Testul LAL, ≤10EU/mg |
| Puritate | ≥95% |
Transport si depozitare
Transport:Înconjurător
Depozitare:A se pastra la 2-8°C
Re-test recomandatViaţă:2 ani
