Robustart Taq ADN polimerază

Robustart Taq DNA Polymerase este o ADN polimerază cu pornire la cald.Acest produs nu numai că poate inhiba mai bine reacția nespecifică cauzată de recoacere nespecifică a primerilor sau de agregare a primerilor în procesul de pregătire și amplificare a sistemului PCR.Prin urmare, are o specificitate excelentă și este mai eficient pentru amplificarea șablonelor de concentrație scăzută și este potrivit pentru reacția de amplificare PCR multiplexată.Mai mult, acest produs are aplicabilitate foarte bună, iar rezultate stabile de amplificare pot fi obținute în diferite tipuri de reacții PCR.

Componente

1.5 U/μL ADN polimerază Robustart Taq

2.10 × PCR Buffer II (fără Mg²+) (opțional)

3.25 mM MgCI₂(optional)

* 10 × PCR Buffer II (fără Mg²+) nu conține dNTP și Mg²+, vă rugăm să adăugați dNTP și MgCl₂la pregătirea sistemului de reacţie.

Aplicații recomandate

1.Amplificare rapidă.

2.Amplificare multiplă.

3.Amplificarea directă a sângelui, tampoanelor și a altor probe.

4.Detectarea bolilor respiratorii.

Starea de depozitare

-20°C pentru depozitare pe termen lung, trebuie amestecat bine înainte de utilizare, evitați înghețarea-dezghețarea frecventă.

*Dacă apar precipitații după refrigerare, este normal;se recomandă echilibrarea la temperatura camerei înainte de amestecare și utilizare.

Definiția unității

O unitate activă (U) este definită ca cantitatea de enzimă care încorporează 10 nmol de dezoxiribonucleotidă în material insolubil în acid la 74°C timp de 30 de minute utilizând ADN-ul de spermă de somon activat ca șablon/amors.

Control de calitate

1.Puritate electroforetică SDS-PAGE mai mare de 98%.

2.Sensibilitate de amplificare, control lot la lot, stabilitate.

3.Fără activitate de nuclează exogenă, fără endonuclează exogenă sau contaminare cu exonuclează

Instrucțiuni

Configurarea reacției

Note:

1) a.Bufferul nu conține dNTP și Mg²+, vă rugăm să adăugați dNTP și MgCl₂la pregătirea sistemului de reacţie.

2) b.Dacă sunt utilizate pentru qPCR/qRT-PCR, în sistemul de reacție trebuie adăugate sonde fluorescente.De obicei, o concentrație finală de primer de 0,2 μM va da rezultate bune;dacă performanța reacției este slabă, concentrația primerului poate fi ajustată în intervalul 0,2-1 μM.Concentrația sondei este de obicei optimizată în intervalul 0,1-0,3 μM.Pot fi efectuate experimente cu gradient de concentrație pentru a găsi cea mai bună combinație de primer și sondă.

Protocol de ciclism termic

Note

1.Rata de amplificare a ADN polimerazei rapide nu trebuie să fie mai mică de 1 kb/10 s.Rata de creștere și scădere a temperaturii, modul de control al temperaturii și eficiența conducției căldurii diferitelor instrumente PCR variază foarte mult, așa că se recomandă optimizarea condițiilor optime de reacție pentru instrumentul PCR rapid specific.

2.Sistemul este foarte adaptabil, cu specificitate și sensibilitate mai mare.

3.Potrivit pentru utilizare ca reactivi de detecție PCR cu sensibilitate ridicată și poate fi utilizat în reacții de amplificare PCR multiplex.

4.activitatea polimerazei 5′→3′, activitatea exonucleazei 5′→3′;fără activitate exonuclează 3′→5′;nicio funcție de corectare.

5.Potrivit pentru testarea calitativă și cantitativă a PCR și RT-PCR.

6.Capătul 3′ al produsului PCR este A, care poate fi donat direct într-un vector T.

7.Metoda în trei etape este recomandată pentru primeri cu temperaturi scăzute de recoacere sau pentru amplificarea fragmentelor mai lungi de 200 bp.