Kit de extracție ADN/ARN viral
Acest kit este potrivit pentru extracția rapidă a ADN-ului/ARN viral de înaltă puritate din probe, cum ar fi tampoane nazofaringiene, tampoane de mediu, supernatanți de cultură celulară și supernatanți omogenați de țesut.Setul se bazează pe tehnologia de purificare cu membrană de silice care elimină necesitatea utilizării solvenților organici fenol/cloroform sau a precipitării cu alcool consumatoare de timp pentru a extrage ADN/ARN viral de înaltă calitate.Acizii nucleici obținuți sunt lipsiți de impurități și sunt gata pentru utilizare în experimente în aval, cum ar fi transcripția inversă, PCR, RT-PCR, PCR în timp real, secvențierea de generație următoare (NGS) și Northern blot.
Conditii de depozitare
Depozitați la 15 ~ 25℃ și transportați la temperatura camerei
Componente
| Componente | 100RXNS |
| Buffer VL | 50 ml |
| Buffer RW | 120 ml |
| ddH2O fără RNază | 6 ml |
| Coloane FastPure ARN | 100 |
| Tuburi de colectare (2 ml) | 100 |
| Tuburi de colectare fără RNază (1,5 ml) | 100 |
Buffer VL:Oferiți un mediu pentru liză și legare.
Buffer RW:Îndepărtați proteinele reziduale și alte impurități.
ddH2O fără RNază:Eluați ADN/ARN din membrana din coloana de spin.
Coloane FastPure ARN:Adsorb în mod specific ADN/ARN.
Tuburi de colectare 2 ml:Se colectează filtratul.
Tuburi de colectare fără RNază 1,5 ml:Colectați ADN/ARN.
Aplicații
Tampoane nazofaringiene, tampoane de mediu, supernatanți de cultură celulară și supernatanți omogenați de țesut.
Mater auto-pregătitials
Vârfuri de pipetă fără RNază, tuburi de centrifugă fără RNază de 1,5 ml, centrifugă, mixer vortex și pipete.
Procesul de experiment
Efectuați toți pașii următori într-un cabinet de biosecuritate.
1. Se adaugă 200 μl de probă într-un tub de centrifugă fără RNază (completează cu PBS sau 0,9% NaCl în cazul probei insuficiente), se adaugă 500 μl de tampon VL, se amestecă bine prin vortexare timp de 15 – 30 de secunde și se centrifughează scurt pentru a colecta amestecul pe fundul tubului.
2. Puneți coloanele FastPure ARN într-un tub de colectare de 2 ml.Transferați amestecul de la Pasul 1 în coloanele FastPure ARN, centrifugeți la 12.000 rpm (13.400 × g) timp de 1 minut și aruncați filtratul.
3. Adăugați 600 μl de tampon RW în coloanele FastPure ARN, centrifugați la 12.000 rpm (13.400 × g) timp de 30 de secunde și aruncați filtratul.
4. Repetați Pasul 3.
5. Centrifugă coloana goală la 12.000 rpm (13.400 × g) timp de 2 min.
6. Transferați cu grijă coloanele FastPure ARN într-un nou tub de colectare fără RNază de 1,5 ml (furnizat în kit) și adăugați 30 – 50 μl de ddH2O fără RNază în centrul membranei fără a atinge coloana.Se lasă să stea la temperatura camerei timp de 1 minut și se centrifugă la 12.000 rpm (13.400 × g) timp de 1 min.
7. Aruncați coloanele FastPure ARN.ADN-ul/ARN poate fi utilizat direct pentru testele ulterioare sau depozitat la -30~ -15°C pentru o perioadă scurtă sau -85 ~-65°C pentru o perioadă mai lungă.
Note
Numai pentru uz de cercetare.A nu se utiliza în proceduri de diagnosticare.
1. Echilibrați probele la temperatura camerei în avans.
2. Virușii sunt foarte contagioși.Vă rugăm să vă asigurați că sunt luate toate măsurile de siguranță necesare înainte de experiment.
3. Evitați înghețarea și dezghețarea repetată a probei, deoarece aceasta poate duce la degradarea sau la reducerea randamentului ADN/ARN viral extras.
4. Echipamentul auto-pregătit include vârfuri de pipetă fără RNază, tuburi de centrifugă fără RNază de 1,5 ml, centrifugă, mixer vortex și pipete.
5. Când utilizați trusa, purtați o haină de laborator, mănuși de latex de unică folosință și o mască de unică folosință și utilizați consumabile fără RNază pentru a minimiza riscul de contaminare cu RNază.
6. Efectuați toți pașii la temperatura camerei, dacă nu se specifică altfel.
Mecanism și flux de lucru
