ADN polimerază Bst 2.0 (fără glicerol, densitate mare)
Bst ADN polimeraza V2 este derivată din Bacillus stearothermophilus ADN polimeraza I, care are activitate de ADN polimerază 5′→3′ și activitate puternică de înlocuire a lanțului, dar nu are activitate exonuclează 5′→3′.Bst DNA Polymerase V2 este ideal pentru deplasarea catenei, amplificarea izotermă LAMP (amplificare izotermă mediată în buclă) și secvențierea rapidă.Această ADN polimerază Bst V2 este capabilă să inhibe activitatea ADN polimerazei la temperatura camerei, astfel încât să poată fi operată și sistemul de reacție poate fi formulat la temperatura camerei, prevenind amplificarea nespecifică și îmbunătățind eficiența reacției, iar această versiune poate fi liofilizat.În plus, este capabil să-și elibereze activitatea la temperaturi ridicate, eliminând astfel necesitatea unei etape de activare separată.
Componente
| Componentă | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst ADN polimerază V2 (fără glicerol) (32U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
| 10×HC Bst V2 tampon | 1,5 ml | 2 × 1,5 ml | 3×10 ml |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 ml | 2 × 1,5 ml | 2×10 ml |
Aplicații
1.Amplificare izotermă LAMPĂ
2.Reacție cu deplasare unică a catetei de ADN
3.Secvențiere ridicată a genei GC
4.Secvențierea ADN-ului la nivel de nanogramă.
Starea de depozitare
Transport sub 0°C și păstrat la -25°C~-15°C.
Definiția unității
O unitate este definită ca cantitatea de enzimă care încorporează 25 nmol de dNTP în material insolubil în acid în 30 de minute la 65°C.
Reacția LAMPĂ
| Componente | 25 μLSistem |
| 10×HC Bst V2 tampon | 2,5 μL |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 μL |
| dNTP-uri (10 mM fiecare) | 3,5 μL |
| SYTO™ 16 verde (25×)a | 1,0 μL |
| Amestecul de grundb | 6 μL |
| Bst ADN polimerază V2 (fără glicerol) (32 U/uL) | 0,25 μL |
| Șablon | × μL |
| ddH₂O | Până la 25 μL |
Note:
1) a.SYTOTM 16 Verde (25×): În funcție de nevoile experimentale, se pot folosi și alți coloranți ca înlocuitori;
2) b.Amestecul de primer: obținut prin amestecarea a 20 uM FIP, 20 uM BIP, 2,5 uM F3, 2,5 uM B3, 5 uM LF, 5 uM LB și alte volume.
Reacție și condiție
1 × HC Bst V2 Buffer, temperatura de incubare este între 60°C și 65°C.
Inactivarea căldurii
80°C, 20 minute.
