Reactiv de eliberare a probei
Reactivul de eliberare a probei este pentru scenariile de diagnostic POCT molecular.Pentru cele două sisteme LAMP de amplificare directă și PCR cu amplificare directă, nu este nevoie de extracția acidului nucleic.Lizatul brut al probei poate fi amplificat direct, gena țintă poate fi detectată cu precizie, timpul de detectare a probei poate fi scurtat și mai mult, ceea ce se potrivește perfect cu cerințele de aplicare ale POCT molecular.Este potrivit pentru tampoane nazale, tampoane pentru gât și alte tipuri de mostre.Probele procesate pot fi utilizate direct pentru detectarea cantitativă prin fluorescență în timp real prin PCR sau LAMP, iar aceleași rezultate ca și metodele convenționale de extracție pot fi obținute fără operațiuni complicate de extracție a acidului nucleic.
Conditii de depozitare
Transportati si depozitati la temperatura camerei.
Control de calitate
Detectare funcțională – qPCR cantitativă: Sistemul de reactiv de eliberare a probei de 800 μl a fost amplificat
cu 1000 de copii Novel Pseudovirus, o probă de tampon nazal, rezultând curbe de amplificare similare șiValorile ΔCt în ± 0,5 Ct.
Procedura experimentalăres
1. Luați 800 μl de reactiv de eliberare a probei și răspândiți soluția de liză în tubul de prelevare de 1,5 ml.
2. Luați tamponul nazal sau tamponul pentru gât cu tamponul; Procedura de prelevare a tamponului nazal: luați tamponul steril și puneți-l în nări, avansați încet până la aproximativ 1,5 cm adâncime, rotiți ușor de 4 ori împotriva mucoasei nazale timp de mai mult de 15 secunde , apoi repetați aceeași operațiune pe cealaltă cavitate nazală cu același tampon. Procedura de prelevare a tamponului gât: luați tamponul steril și ștergeți ușor amigdalele faringiene și peretele faringian posterior de 3 ori.
3.Puneți tamponul imediat în tubul de prelevare.Capul tamponului trebuie rotit și amestecat în soluția de depozitare timp de cel puțin 30 de secunde pentru a se asigura că proba este complet eluată în tubul de prelevare.
4. Incubarea la temperatura camerei (20 ~ 25 ℃) timp de 1 minut, pregătirea tamponului de liză este finalizată.
5. Atât RT-PCR de sistem de 25 μl, cât și RT-LAMP au fost compatibile cu o cantitate de 10 μl de adăugare de șablon pentru experimentele de detectare.
Note
1. Cantitatea minimă de probă de lizat direct corespunzătoare unui singur tampon poate fi ajustată la 400μl, care poate fi ajustată în funcție de nevoile de testare.
2. Odată procesată proba de reactivul de eliberare a probei, se recomandă efectuarea următoarei etape a testului cât mai curând posibil, intervalul de timp de așteptare este de preferință mai mic de 1 oră.
3. pH-ul lizatului de probă este acid, iar sistemul de detectare trebuie să aibă un anumit tampon.Este potrivit pentru majoritatea detectării fluorescenței PCR, RT-PCR și LAMP cu tampon pH, dar nu este potrivit pentru detectarea colorimetrică LAMP fără tampon.
