Ultra Nuclease de grad GMP
Cat No: HC2016A
UltraNuclease GMP-grade este exprimat și purificat în Escherichia coli (E.coli) prin inginerie genetică și preparat în medii GMP.Poate reduce vâscozitatea supernatantului celular și a lizatului celular în cercetarea științifică, poate crește eficiența purificării proteinelor și poate îmbunătăți cercetarea funcțională a proteinelor.Produsul poate reduce, de asemenea, reziduurile de acid nucleic gazdă la gradul pg, îmbunătățind performanța și siguranța produselor biologice din aplicații, inclusiv purificarea virusului, fabricarea vaccinurilor și fabricarea de proteine/polizaharide farmaceutice.În plus, produsul poate fi aplicat și pentru a preveni aglomerarea celulelor mononucleare din sângele periferic uman (PBMC) în terapia celulară și dezvoltarea vaccinului.
UltraNuclease este furnizat sub forma unui reactiv sterilizat, eluat în tampon (20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glicerină), cu aspectul unui lichid transparent, incolor.Acest produs este produs conform cerințelor procesului GMP și furnizat sub formă lichidă.
Componente
UltraNuclease GMP-grade (250 U/μL)
Conditii de depozitare
Produsul este livrat cu gheață carbonică și poate fi păstrat la -25℃~-15°C timp de doi ani.
Dacă produsul este deschis și a fost păstrat la 4℃ mai mult de o săptămână, vă recomandăm să filtrațiprodusul pentru a preveni contaminarea microbiană.
Specificații
| Gazdă de expresie | E. coli recombinant cu gena UltraNuclease |
| Greutate moleculară | 26,5 kDa |
| punct soelectric | 6,85 |
| Puritate | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Buffer de stocare | 20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCI, 50% glicerină |
|
Definiția unității | Definiția unei unități de activitate (U) este cantitatea de enzimă utilizatămodificați valoarea de absorbție a ΔA260 cu 1,0 în 30 de minute într-o cantitate de 2,625 mLsistem de reacție la 37℃ cu un pH de 8,0 (echivalent cu digestia completă a37 μg ADN de spermă de somon în oligonucleotide). |
Instrucțiuni
1. Proba Colectie
Celulele aderente: îndepărtați mediul, spălați celulele cu PBS și îndepărtați supernatantul.
Celulele în suspensie: colectați celulele prin centrifugare, spălați celulele cu PBS, centrifugați la 6.000rpm timp de 10 min, colectați peletul.
Escherichia coli: colectați bacteriile prin centrifugare, spălați o dată cu PBS, centrifugați la 8.000rpm timp de 5 minute și colectați peletul.
2. Tratamentul probei
Tratați peletele celulare colectate cu tampon de liză în raportul dintre masă (g) și volum (mL) 1: (10-20) sau prin metode mecanice sau chimice pe gheață sau la temperatura camerei (1 g de pelete de celule conține aproximativ
109 celule).
3. Tratamentul Enzimatic
Se adaugă 1-5 mM MgCl în sistemul de reacție și se ajustează pH-ul la 8-9.
Adăugați UltraNuclease în funcție de raportul de 250 de unități pentru a digera 1 g de pelete celulare, incubați la 37 ℃ timp de mai mult de 30 de minute.Vă rugăm să consultați formularul „Timp de reacție recomandat” pentru a alegedurata tratamentului.
4. Supernatant Colectie
Se centrifugă la 12.000 rpm timp de 30 de minute și se colectează supernatantul.
Notă: Dacă soluția este acidă sau alcalină sau conține concentrații mari de sare, detergenți saudenaturanți, vă rugăm să creșteți doza de enzime sau să prelungiți timpul de tratament în consecință.
Condiții de reacție recomandateons
| Parametru | Stare optimă | Conditor eficient |
| Mg²+Concentrație | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatura | 37℃ | 0-42℃ |
| Concentrarea TDT | 0-100 mM | >0 mM |
| Concentrația de mercaptoetanol | 0-100 mM | >0 mM |
| Concentrația de cationi monovalenți | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Concentrația de fosfat | 0-10 mM | 0-100 mM |
Recomandat Reacţie Timp (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Cantitatea de ultranuclează (concentrația finală) | Timp de reactie |
| 0,25 U/ml | >10 ore |
| 2,5 U/ml | >4h |
| 25 U/ml | 30 minute |
Note:
Vă rugăm să purtați EIP necesar, cum ar fi halatul de laborator și mănuși, pentru a vă asigura sănătatea și siguranța!
